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白DsRed吸收截面光譜但是匀谣，巨幅提高每個時間和面積上可用光子數(shù)量對圖像的真正影響是什么呢照棋？一、更高的激發(fā)效率武翎，更高的圖像亮度理論上烈炭，在雙光子顯微鏡中，圖像的亮度與激發(fā)效率直接相關(guān)宝恶，而激發(fā)效率完全依賴于光子通量和熒光團(tuán)的二階非線性激發(fā)截面(GM) 符隙。作為一個例子趴捅，我們可以嘗試計(jì)算熒光蛋白mRFP在15fs激光脈寬（如SCH飛秒激光器）和1050nm中波長照射下的激發(fā)效率。與100fs的激光器相比霹疫，15fs激光器具有更寬的帶寬（達(dá)200nm）拱绑，可以在900到1200nm之間激發(fā)mRFP，與100fs激光器的11nm相比丽蝎，這是一個更寬的光譜區(qū)域猎拨。圖3：藍(lán)色曲線：以1050nm為中心的SCH 15f ...
微小的雙光子吸收截面將熒光產(chǎn)生限制在顯微鏡物鏡的聚焦體積內(nèi)。為了對樣品中的單個光學(xué)截面進(jìn)行成像屠阻，2PFM在二維掃描激發(fā)焦點(diǎn)并記錄每個位置的熒光信號红省，衍射極限焦點(diǎn)提供z亮的熒光信號以及z高的空間分辨率。然而栏笆，只有通過自適應(yīng)光學(xué)(adaptive optics, AO)才能維持在體深度的高空間分辨率类腮，自適應(yīng)光學(xué)可以測量和校正成像光穿過光異質(zhì)樣品時在波前積累的光學(xué)像差。AO與2PFM相結(jié)合蛉加，將校正的相位模式應(yīng)用于物鏡后瞳平面(back pupil plane)的激發(fā)波前，可以實(shí)現(xiàn)衍射極限性能缸逃，并且可以在大腦表面以下數(shù)百微米處解析突觸针饥。大腦的在體成像也需要高時間分辨率，對于大腦內(nèi)的功能成像需频，需要亞秒級 ...
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