拉曼光譜中熒光抑制方法的主要類別拉曼光譜在大多數(shù)應(yīng)用中的一個嚴(yán)重問題是強熒光背景杠茬,這部分歸因于拉曼光譜的低截面散射月褥。在激光激發(fā)下,熒光與Stokes Raman散射同時發(fā)生瓢喉,因為紅移的Stokes Raman散射與熒光發(fā)射光譜重疊宁赤。反斯托克斯拉曼散射不存在熒光問題,因為與激發(fā)波長相比栓票,反斯托克斯拉曼散射是藍移的决左,因此在光譜中與熒光自然分離。當(dāng)用可見光激發(fā)時走贪,熒光本底問題更為嚴(yán)重佛猛。拉曼光譜中的強熒光信號直接影響拉曼測量的準(zhǔn)確性和靈敏度。熒光和自發(fā)拉曼信號在波長維度上重疊坠狡,因此不能用簡單的濾光片分離继找。幸運的是,它們在以下性質(zhì)上有所不同逃沿,這是許多拉曼測量中熒光抑制方法的基礎(chǔ):1.熒光發(fā)射壽命(納秒量 ...
抑制熒光的時域拉曼光譜技術(shù)圖1顯示了激發(fā)激光脈沖婴渡、發(fā)射拉曼散射信號和發(fā)射熒光的時間輪廓。熒光過程包括激發(fā)凯亮、內(nèi)部轉(zhuǎn)換和發(fā)射三個重要步驟边臼,每個步驟都發(fā)生在不同的時間尺度上。首先触幼,入射光子激發(fā)熒光團分子的時間為飛秒(10-15秒)量級硼瓣。其次,振動弛豫的無輻射內(nèi)轉(zhuǎn)換過程也非持们快堂鲤,在10-14 ~ 10-11 s之間。最后媒峡,熒光發(fā)射是一個緩慢的過程瘟栖,大約發(fā)生在10-9-10-7 s左右。熒光壽命是指分子在發(fā)射熒光光子前處于激發(fā)態(tài)的平均時間谅阿。圖1所示的指數(shù)衰減曲線說明了熒光發(fā)射時間的統(tǒng)計分布半哟。單熒光團的熒光時間輪廓符合壽命常數(shù)τ的指數(shù)函數(shù)酬滤,而拉曼發(fā)射幾乎與激發(fā)激光同時發(fā)生。由于拉曼信號比熒光信號的發(fā)射速度 ...
算的寓涨,尤其在熒光應(yīng)用領(lǐng)域廣泛)盯串。45 mm的齊焦設(shè)計可以在Z短光程的基礎(chǔ)上實現(xiàn)高分辨率,高視場亮度的效果戒良。4.工作距離物鏡的工作距離是指顯微鏡準(zhǔn)確聚焦至樣品表面后体捏,待測樣品表面與物鏡的Z前端表面之間的距離。物鏡的放大率越高糯崎,工作距離越短几缭。使用時,待測樣品應(yīng)位于物鏡的一到二倍焦距之間沃呢。因此年栓,它和焦距是兩個不同的參數(shù),顯微鏡調(diào)焦的步驟實際是在調(diào)節(jié)物鏡的工作距離薄霜。在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下某抓,工作距離短,孔徑角則大黄锤。數(shù)值孔徑大的高倍物鏡搪缨,其工作距離小食拜。5.分辨率分辨率是指能清晰的分辨待測樣品表面兩點間的Z小距離鸵熟,通常用d表示。分辨率決定了顯微鏡分辨樣品上細節(jié)的程度负甸。顯微鏡的物鏡是使物體放大成實像流强,目鏡 ...
實現(xiàn)時間分辨熒光光譜需要記錄激光脈沖激發(fā)后發(fā)射光隨時間變化的強度分布。理論上可以記錄單個激發(fā)-發(fā)射循環(huán)的信號的時間衰減曲線呻待,但在實際應(yīng)用中還存在著許多問題打月。首先,要記錄的時間衰減非巢献剑快奏篙,比如普遍使用的有機熒光團的光致發(fā)光過程僅持續(xù)幾百皮秒到幾十納秒;另外不僅要獲取熒光壽命迫淹,還要還原熒光衰減曲線形狀秘通,通常為了解決多指數(shù)衰減,必須能夠在時間上將記錄的信號解析到這樣的程度:由幾十個樣品進行衰減敛熬。使用普通的電子瞬態(tài)記錄儀很難達到所需的時間分辨率肺稀。 另外如果發(fā)射的光太弱則無法產(chǎn)生代表光通量的模擬電壓。 實際上光信號可能只有每個激發(fā)/發(fā)射周期的幾個光子应民。 然后信號本身的離散特性導(dǎo)致無法進行模擬采樣话原。 即使 ...
率以快速獲取熒光衰減直方圖夕吻,比如在要研究動態(tài)壽命變化或快速分子轉(zhuǎn)變或必須收集大量壽命樣本(例如二維掃描成像)的情況下,這可能特別重要繁仁。PMT(取決于設(shè)計)可以處理高達每秒 1 到 20 百萬次計數(shù) (cps) 的計數(shù)率涉馅。基于老式 NIM 的 TCSPC 電子設(shè)備最多能夠處理 50,000 到 500,000 cps黄虱。采用現(xiàn)代集成 TCSPC 設(shè)計控漠,例如 TimeHarp 260,可實現(xiàn)高達 40 Mcps 的計數(shù)率悬钳。韓國Nanobase 共聚焦光路結(jié)合PicoQuant單光子計數(shù)技術(shù)可實現(xiàn)高效率熒光壽命成像盐捷。您可以通過我們的官方網(wǎng)站了解更多的產(chǎn)品信息,或直接來電咨詢4006-888-532。 ...
出現(xiàn)了很強的熒光背景写烤,這進一步表明了注入過程中強有力摻雜效應(yīng)默蚌。再去除外加電壓之后,石墨烯表面出現(xiàn)了和原始樣品相似的拉曼光譜滞诺。圖1. 離子液體注入多層石墨烯器件的原位拉曼測試:(a)原位拉曼測試過程圖解;(b)在不同偏壓下表面多層石墨烯的拉曼光譜环疼;(c)原始(黑色)习霹、注入(紅色)和非注入(藍色)的多層石墨烯表面的拉曼光譜圖如圖2所示,多層石墨烯在插入偏壓的薄層阻抗通過四點電阻率法來測試炫隶,石墨烯層之間弱的范德華力允許原子或小分子注入到范德華間隙中淋叶。在此種情況下,離子液體中的陽離子/陰離子在偏壓下注入層中伪阶,結(jié)果石墨烯上的電荷密度顯著增加并且多層石墨烯的薄膜阻抗在低于2V從11Ω顯著降低到高于3.5V ...
器雙光子激發(fā)熒光(TPEF)顯微鏡煞檩,也稱為雙光子顯微鏡,是對活體組織深層三維成像的第1方法栅贴。深度成像是TPEF顯微鏡固有的優(yōu)勢斟湃,它使用了更長的激發(fā)波長(通常是近紅外波段),因而其帶來的散射比傳統(tǒng)共聚焦顯微鏡中所使用的較短的可見波長更少檐薯。更長的波長同時也減少了來自散射光的背景照明凝赛,并增加了在更高深度處的對比度。目前坛缕,用TPEF顯微鏡可以獲得1mm深度的體內(nèi)大腦圖像墓猎。在熒光顯微鏡中,當(dāng)兩個獨立的光子被一種介質(zhì)同時吸收時祷膳,就會發(fā)生雙光子激發(fā)陶衅。這需要兩個合適能量的光子在這樣的介質(zhì)上時間和空間上同時重合;通常來說這不需要非常大的激發(fā)光子通量直晨,當(dāng)然光子通量越大搀军, 雙光子同時被吸收的概率就越大膨俐。在TPEF顯 ...
金相顯微鏡或熒光鏡檢法。1. 透射式照明透射式照明方法按照其光軸方向又分中心照明和斜射照明兩種形式:(1) 中心照明:中心照明是最普遍的透射式照明法罩句,其特點是照明光束的中軸與顯微鏡的光軸同在一條直線上焚刺,一般從待觀察樣品的正下方入射。它又分為臨界照明和柯勒照明兩種门烂。圖1.臨界照明臨界照明:如上圖1乳愉,臨界照明的光源經(jīng)聚光鏡聚焦后成像在待觀察樣品上,光束狹而強屯远,這是它的優(yōu)點蔓姚。但是光源的燈絲像與被檢物體的平面重合,這樣會造成待觀察樣品表面的照明不均勻慨丐,在有燈絲像的部分照明比較亮坡脐;無燈絲像的部分照明就較為暗,不僅會影響成像的質(zhì)量房揭,更不適合顯微照相备闲,這是臨界照明的主要缺陷。針對上述問題的解決方法是在光源的 ...
捅暴,利用特殊的熒光染料或者蛋白質(zhì)熒光探針(鈣離子指示劑恬砂,calcium indicator),將神經(jīng)元當(dāng)中的鈣離子濃度通過雙光子吸收激發(fā)的熒光強度表征出來蓬痒,從而達到檢測神經(jīng)元活動的目的泻骤。美國Meadowlark Optics公司專注于模擬尋找純相位空間光調(diào)制器的設(shè)計、開發(fā)和制造乳幸,有40多年的歷史瞪讼,該公司空間光調(diào)制器產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于自適應(yīng)光學(xué),散射或渾濁介質(zhì)中的成像粹断,雙光子/三光子顯微成像,光遺傳學(xué)嫡霞,全息光鑷(HOT)瓶埋,脈沖整形,光學(xué)加密诊沪,量子計算养筒,光通信,湍流模擬等領(lǐng)域端姚。其新推出的HSP1K(1024x1024)SLM系列的高刷新速度晕粪、高損傷閾值、大通光孔面的特性十分適用于雙光子/多光子/鈣離子成 ...
NA 檢測渐裸、熒光生化檢測巫湘、工業(yè)標(biāo)示装悲、科研、激光顯示等領(lǐng)域有重要的需求和應(yīng)用尚氛。其中诀诊,532nm最為常見。而532固態(tài)泵浦激光器的工作過程一般如下:1.808nm半導(dǎo)體激光器作為泵浦光源阅嘶。2.808nm入射Nd YAG晶體属瓣,產(chǎn)生1064nm基頻光。3.1064nm基頻光經(jīng)過倍頻晶體讯柔,經(jīng)過非線性效應(yīng)倍頻之后抡蛙,波長減半,頻率加倍魂迄,產(chǎn)生532nm綠光溜畅。您可以通過我們昊量光電的官方網(wǎng)站www.wjjzl.com了解更多的產(chǎn)品信息,或直接來電咨詢4006-888-532极祸,我們將竭誠為您服務(wù)慈格。 ...
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