超分辨熒光顯微成像技術(shù)單分子定位熒光顯微成像包括光激活定位顯微（PALM）和隨機光學(xué)重構(gòu)顯微（STORM）欺旧。兩者的原理相似，成像過程均需要往復(fù)循環(huán)蛤签，在每個循環(huán)周期里辞友，熒光分子團被連續(xù)的激活、成像及漂白震肮。PALM工作原理光激活定位顯微技術(shù)photoactivated localization microscopy（PALM）其基本原理是首先使用光活化綠色熒光蛋白（PA-GFP）來標記蛋白質(zhì)称龙，并將較低光功率的405nm 激光照射細胞表面，用于激活稀疏分布的幾個熒光分子戳晌。之后用561nm激光照射鲫尊，使已經(jīng)激活的熒光分子因為受激發(fā)射而產(chǎn)生熒光信號，接著繼續(xù)照射使這些發(fā)光的熒光分子產(chǎn)生漂白沦偎， 在下一輪不能 ...
M高速像增強熒光相機用于斑馬魚心臟的高速活體成像技術(shù)在德國巴德諾海姆的Max Planck心肺研究所疫向，人們對斑馬魚的心血管系統(tǒng)進行了研究。斑馬魚的透明度（圖1）及其實驗優(yōu)勢使其成為人體心血管系統(tǒng)的理想比例模型豪嚎。圖1 斑馬魚的照片搔驼。心臟位于紅色方塊內(nèi)為了研究斑馬魚的血液流動，血紅細胞被熒光蛋白DsRed標記侈询。熒光的強度受到附著在紅細胞上的熒光蛋白數(shù)量的限制舌涨。此外，光線發(fā)射的方向是隨機的妄荔，這進一步減少了到達相機的光量泼菌。低光強度不一定存在問題，增加曝光時間來捕捉足夠的光是一個常用的解決方法，這通常被用于成像固定的昏暗物體嘉熊。然而拧略，在移動物體上使用相同的方法會導(dǎo)致圖像模糊。試想一條活的斑馬魚偿乖，它的內(nèi)臟是 ...
LIFA熒光壽命成像在微流體中的運用——研究氧在濕滑氣液界面上的輸運微流體提供了一個理想的平臺，允許集成“可控”的表面和直接測量附近的傳輸現(xiàn)象新症。Elif Karatay在特文特大學(xué)攻讀博士學(xué)位期間使用微流體氣泡墊層恳蹲，制作了其中一個微通道壁作為由交替固體壁和微氣泡組成的超疏水表面(圖1)虐块。她通過熒光壽命成像顯微鏡實驗測量和數(shù)值估計了在短接觸時間內(nèi)穩(wěn)定氣液界面上氣體吸收的動態(tài)傳質(zhì)。圖1 (a)微流控氣泡墊嘉蕾。(b)FLIM實驗中相同設(shè)置下水中溶解氧的數(shù)值模擬贺奠，顏色條表示氧的濃度。(c)由FLIM解析的壽命場疊加在亮場顯微鏡圖像上错忱，顯示氣泡進入到水中儡率，顏色條表示熒光壽命，以納秒為單位以清。通過頻域熒光壽命 ...
術(shù)包括X射線熒光光譜儿普，激光誘導(dǎo)擊穿光譜，可見光到近紅外（VIS-NIR）和中紅外（MIR）光譜掷倔。在光譜預(yù)處理和多變量建模的幫助下眉孩，使用單個傳感器成功估計了各種土壤特性，例如SOC勒葱。盡管使用單個傳感器進行土壤研究的研究顯示出有希望的結(jié)果浪汪，但沒有一個單獨的傳感器可以充分捕獲土壤的復(fù)雜性。因此错森，每種技術(shù)的單個光譜范圍可能沒有足夠的信息來為特定土壤性質(zhì)提供合理的預(yù)測精度吟宦。提高預(yù)測元素準確性的一種可行方法是合并和整合來自多個傳感器的數(shù)據(jù)，這稱為數(shù)據(jù)融合涩维。VIS-NIR和MIR光譜技術(shù)都顯示出確定SOC的巨大潛力殃姓，VIS-NIR和MIR光譜的數(shù)據(jù)融合在改善SOC估計方面的潛力值得探索。已經(jīng)提出并探索了不同 ...
某些物質(zhì)產(chǎn)生熒光瓦阐。2.3 γ射線的產(chǎn)生及性質(zhì)γ射線是由放射性物質(zhì)（Co蜗侈、Ir等）內(nèi)部原子核的衰變過程產(chǎn)生的。γ射線的性質(zhì)與X射線相似睡蟋，由于其波長比X射線短踏幻，因而射線能量高，具有更大的穿透力戳杀。例如该面，目前廣泛使用的γ射線源Co，它可以檢查250mm厚的銅質(zhì)工件信卡、350mm厚的鋁制工件和300mm厚的鋼制工件隔缀。2.4. 射線當射線穿透物質(zhì)時，由于物質(zhì)對射線有吸收和散射作用傍菇，從而引起射線能量的衰減猾瘸。射線在物質(zhì)中的衰減是按照射線強度的衰減是呈負指數(shù)規(guī)律變化的，以強度為I的一束平行射線束穿過厚度為δ的物質(zhì)為例，穿過物質(zhì)后的射線強度為：I=Ie式中I—－射線透過厚度δ的物質(zhì)的射線強度牵触；I—－射線的初始強度淮悼； ...
性，而不需要熒光標簽揽思。樣品可以以完全無接觸和無標簽的方式被詢問袜腥，防止對系統(tǒng)的破話。紅外（IR）光譜是另一種常用的獲得振動光譜的方法钉汗。紅外光譜和拉曼光譜的選擇規(guī)則是不同的瞧挤；紅外光譜對偶極子的變化很敏感，而拉曼光譜對偏振性的變化很敏感儡湾。這使得紅外和拉曼成為一組特定化學(xué)鍵的良好工具特恬。對于成像和顯微鏡的應(yīng)用，在選擇紅外或拉曼光譜時徐钠，還有兩個重要因素需要考慮癌刽。1）空間分辨率要求。紅外光譜法使用紅外光作為光源尝丐。拉曼可以使用可見光或近紅外（NIR）激光器進行激發(fā)显拜。由于可見或近紅外激光器的波長更短，拉曼顯微鏡的空間分辨率可以達到亞微米級爹袁。另一方面远荠，紅外光的波長為幾微米。對于許多顯微鏡的應(yīng)用來說失息，其空間分辨率被 ...
能夠充分激發(fā)熒光團譬淳。在比較單束和五束成像模式的實驗中，我們將DOE保留在原位盹兢，并在兩種實驗中生成5個小波束邻梆，它的區(qū)別是在單束實驗中，我們簡單地在中間成像平面放置一個簡單的虹膜隔膜绎秒，作為四個小波束路徑上的屏障浦妄，只允許一個通過)。在這些條件下见芹，在800 nm處剂娄，單個中心光束對樣品的功率為24 mW，而所有五束光的功率之和對樣品的功率為108 mW玄呛，其他四束的平均功率為21 mW阅懦，每個都在平均值的5%以內(nèi)。檢鏡掃描與單光束雙光子光柵掃描成像相同把鉴，并使用放大光電倍增管(PMT)進行檢測(PMT: H7422-P40 Hamamatsu, Bridgewater, NJ, USA;放大器:信號恢復(fù)AME ...
深度易受背景熒光影響對背景熒光免疫全光譜選定的光譜信息表2.CARS和SRS的比較CARSSRS參數(shù)化過程能量傳遞過程新光頻信號透射激勵光束的強度增益和損耗非特定的非共振背景無非共振背景扭曲的光譜與自發(fā)拉曼光譜相同相干圖像偽影信號是物體與點擴散函數(shù)的卷積非線性濃度依賴性線性濃度依賴性CARS的產(chǎn)生條件與SRS相同故黑，但檢測方法不同。在SRS中庭砍，可以檢測到激勵束的強度增益和強度損失场晶，而在CARS，反斯托克斯頻率下的新輻射ωaS = 2ωp?ωS 怠缸。CARS是由被稱為四波混合的光學(xué)參量過程產(chǎn)生的诗轻，在這個過程中能量在光場之間交換。這與SRS相反揭北，SRS是光場和樣品之間的能量傳遞過程扳炬。這解釋了為什么如果 ...
如雙光子激發(fā)熒光和二次諧波產(chǎn)生(SHG)顯微鏡，需要一個單一的激發(fā)光束搔体。早期大多數(shù)CARS顯微鏡使用了兩個獨立的電子同步皮秒Ti:sapphire振蕩器恨樟，導(dǎo)致系統(tǒng)非常龐大和復(fù)雜。這很快就被目前單頻CRS顯微鏡中的“金標準”所取代疚俱，該標準由皮秒Nd:YVO4振蕩器同步泵浦光學(xué)參數(shù)振蕩器(OPO)組成劝术，這種激光系統(tǒng)的復(fù)雜性促使人們進行了密集的研究，旨在大幅減少占地面積和價格呆奕，同時提高可靠性养晋，其主要是通過光纖格式架構(gòu)。一類系統(tǒng)是基于飛秒Er:光纖振蕩器在1550 nm梁钾，播種一對摻鉺光纖放大器绳泉，其中一個是高度非線性光纖。通過對厚SHG晶體中的兩個脈沖序列進行頻率倍增和頻譜壓縮姆泻，可以合成775 nm的皮 ...
近調(diào)諧時零酪，為熒光標記目的開發(fā)的熒光團顯示高達倍的振動響應(yīng)的出色增強。結(jié)果是這種熒光探針可以通過CRS工藝在亞微米濃度下檢測到拇勃。這是重要的蛾娶，因為它開辟了在多標簽樣品中映射不同探針的可能性，不同探針的數(shù)量受限于拉曼線的帶寬潜秋，而不是熒光的帶寬蛔琅。由于檢測通道之間的串擾，在熒光顯微鏡中使用四個以上探針標記樣品具有挑戰(zhàn)性峻呛，而在共振增強SRS成像中罗售，多探針標記可以擴展到數(shù)十個不同的探針。就多重成像而言钩述，這種能力是一個巨大的勝利寨躁，因為許多細胞生物學(xué)研究需要多個分子參與者的可視化來揭示細胞內(nèi)的過程和途徑。通過共振增強SRS提供的多路復(fù)用能力可以進一步推動到更低的探針濃度牙勘。通過讓探針選擇性僅由SRS激發(fā)過程決定职恳， ...
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