何,發(fā)色團或熒光團在單位時間內(nèi)產(chǎn)生的激發(fā)-發(fā)射循環(huán)次數(shù)都不能超過一定數(shù)量污尉。因此膀哲,信號不能通過增加功率來增強,因為它實際上已經(jīng)飽和被碗∧诚埽克服這第②個限制的一個邏輯方法是并行化激勵過程,并使用一種可以同時從樣本的多個點激勵和獲取信號的方案锐朴。傳統(tǒng)的寬視場照明正是這樣做的兴喂。然而對于非線性光學(xué)方法衣迷,如雙光子熒光顯微鏡酱酬,寬視場照明不是一個實用的選擇壶谒,因為現(xiàn)有的超快脈沖激光源不能提供足夠的功率來同時激發(fā)整個視場膳沽。雖然超快激光不能照亮整個領(lǐng)域汗菜,但它們的能量足以同時照亮許多感興趣的點挑社。困難在于有效地將光線重新分配到只需要關(guān)注的區(qū)域。純相位型SLM非常適合這項任務(wù)痛阻,它們可以動態(tài)地調(diào)整可用于成像和光刺激的活動波束的數(shù)量 ...
M有利于探測熒光團的分子環(huán)境菌瘪,以了解光強測量無法闡明的熒光團行為阱当。圖1中概述了時域和頻域的FLIM測量麻车,并在下面進行詳細描述缀皱。簡單地說,時域熒光壽命測量使用短脈沖光進行激發(fā)(相對于樣品的壽命較短)动猬,然后直接(即通過門控檢測或脈沖采樣)或使用時間分辨電子技術(shù)記錄熒光分子的指數(shù)衰減如圖1(a)及1(b)啤斗。另外,頻域技術(shù)也可以測量熒光壽命如圖1(c)和1(d)赁咙。這里钮莲,激勵是連續(xù)的,隨著時間的推移彼水,振幅調(diào)制為正弦波崔拥。熒光信號的相位和振幅隨激發(fā)波的變化而變化。通過繪制在一定調(diào)制頻率范圍內(nèi)的相位變化凤覆,可以看到熒光團的相位延遲和振幅調(diào)制如圖1(d)。得到的熒光正弦信號可以在頻域解調(diào)盯桦,以量化熒光強度指數(shù)衰減引 ...
熒光是分子(熒光團)通過發(fā)射可檢測的光子(時間尺度為)衰減到基態(tài)的輻射過程慈俯。熒光發(fā)射發(fā)生在激發(fā)電子能級最低的位置(S1)。這種來自最低激發(fā)電子能級的強制發(fā)射確保了發(fā)射光譜保持不變拥峦,并且與激發(fā)波長無關(guān)贴膘。由于振動弛豫和內(nèi)部轉(zhuǎn)換中的能量損失,發(fā)射的熒光光子的能量較低(即發(fā)射發(fā)生在比激發(fā)更長的波長)略号。這種發(fā)射波長的位移稱為斯托克斯位移刑峡。另一個主要發(fā)光過程,磷光玄柠,通過被稱為系統(tǒng)間交叉(ISC)的過程發(fā)生在激發(fā)時電子能量躍遷到三元態(tài)能級(T1;T2;:::;Tn)突梦。三重態(tài)的電子具有平行自旋,這些電子躍遷是“自旋禁止的”羽利,通過發(fā)射一個磷光光子或ISC反轉(zhuǎn)和發(fā)射一個延遲的熒光光子宫患,導(dǎo)致向地能級的緩慢躍遷。磷光 ...
能夠充分激發(fā)熒光團铐伴。在比較單束和五束成像模式的實驗中,我們將DOE保留在原位俏讹,并在兩種實驗中生成5個小波束当宴,它的區(qū)別是在單束實驗中,我們簡單地在中間成像平面放置一個簡單的虹膜隔膜泽疆,作為四個小波束路徑上的屏障户矢,只允許一個通過)。在這些條件下殉疼,在800 nm處梯浪,單個中心光束對樣品的功率為24 mW捌年,而所有五束光的功率之和對樣品的功率為108 mW,其他四束的平均功率為21 mW挂洛,每個都在平均值的5%以內(nèi)礼预。檢鏡掃描與單光束雙光子光柵掃描成像相同,并使用放大光電倍增管(PMT)進行檢測(PMT: H7422-P40 Hamamatsu, Bridgewater, NJ, USA;放大器:信號恢復(fù)AME ...
記目的開發(fā)的熒光團顯示高達倍的振動響應(yīng)的出色增強虏劲。結(jié)果是這種熒光探針可以通過CRS工藝在亞微米濃度下檢測到托酸。這是重要的,因為它開辟了在多標(biāo)簽樣品中映射不同探針的可能性柒巫,不同探針的數(shù)量受限于拉曼線的帶寬励堡,而不是熒光的帶寬。由于檢測通道之間的串?dāng)_堡掏,在熒光顯微鏡中使用四個以上探針標(biāo)記樣品具有挑戰(zhàn)性应结,而在共振增強SRS成像中,多探針標(biāo)記可以擴展到數(shù)十個不同的探針泉唁。就多重成像而言鹅龄,這種能力是一個巨大的勝利,因為許多細胞生物學(xué)研究需要多個分子參與者的可視化來揭示細胞內(nèi)的過程和途徑游两。通過共振增強SRS提供的多路復(fù)用能力可以進一步推動到更低的探針濃度砾层。通過讓探針選擇性僅由SRS激發(fā)過程決定,原則上可以放寬檢測 ...
alk是由于熒光團(如FITC和Cy3)的激發(fā)和發(fā)射光譜的波長范圍有所交集肛炮。即使Cy3熒光團是較合適被綠色(~550 nm)光激發(fā),它同樣也能被青色(475 nm)光激發(fā)到足夠的程度宝踪,在圖2中很容易被檢測到侨糟。通過將四帶通多邊分束器和發(fā)射濾光片改為單帶通二向色鏡和發(fā)射濾光片來消除crosstalk信號,從而在檢測系統(tǒng)的發(fā)射側(cè)實現(xiàn)了更精確的阻擋瘩燥。這種解決方案是一種妥協(xié)秕重,因為它以速度為代價提高了分辨率。當(dāng)然在熒光成像時厉膀,我們需要盡可能的去減小bleedthrough以及crosstalk的影響選擇熒光染料時溶耘,應(yīng)盡量選擇發(fā)射光譜帶寬較窄的同時使用多種熒光染料時,應(yīng)盡量選擇光譜間沒有重疊的服鹅,以免產(chǎn)生信號 ...
等光譜相似的熒光團起到激發(fā)作用凳兵。同樣也有針對細胞遺傳學(xué)檢測實驗中熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)對475-600nm區(qū)域進行輸出的SOLA FISH型號企软。以及提供zui廣泛光譜覆蓋范圍庐扫,用于激發(fā)熒光團(Cy7和ICG)近紅外輸出的LED白光光源SOLA V-nIR 和 U-nIR。滿足您各種所需波長的需求。Lumencor的LED白光光源擁有精確控制的快速調(diào)節(jié)形庭,可以對光源的輸出功率進行調(diào)節(jié)铅辞。LED光源所產(chǎn)生的熱輻射較低,不會對于微流控反應(yīng)器產(chǎn)生過多的熱量影響萨醒,從而保證反應(yīng)的精度和穩(wěn)定性斟珊。SOLA系列的LED白光光源耗電量較低,即開即 ...
验靡,特別設(shè)計的熒光團優(yōu)先在腫瘤中積聚倍宾。當(dāng)用適當(dāng)波長的光激發(fā)時,這些材料發(fā)出熒光胜嗓,以對比的偽色實時顯示腫瘤和其他結(jié)構(gòu)高职。這支持更完整的腫瘤切除和更好的患者預(yù)后。大多數(shù)FGS熒光團被650-810 nm光譜范圍內(nèi)的單色光激發(fā)辞州。那些具有近紅外照明的熒光特別有效怔锌,因為更大的穿透深度可以顯示地下生長。此外变过,一些臨床批準(zhǔn)的染料被紫色(405 nm)和青色(490 nm)輸出激發(fā)埃元。由于短波長的穿透深度有限,這些材料通常應(yīng)用于表面病變媚狰。傳統(tǒng)上岛杀,熒光成像系統(tǒng)包含激光,這可能是昂貴的崭孤,復(fù)雜的类嗤,而且往往喜怒無常。光纖耦合LED在這種應(yīng)用中的優(yōu)勢首先是堅固性——當(dāng)生命受到威脅時辨宠,系統(tǒng)不會失敗遗锣。LED足夠堅固,可以承受在醫(yī) ...
長設(shè)置為目標(biāo)熒光團常規(guī)激發(fā)所需波長的兩倍嗤形。在且僅在束腰處精偿,聚焦的峰值光強超過雙光子激發(fā)的閾值。這提供了固有的3D分辨率赋兵,并消除了對有損耗的共聚焦孔的需要笔咽。然而,這兩種技術(shù)都受到實際成像中的需要取舍的負(fù)面影響霹期,例如以捕獲代謝過程所需的幀率在組織內(nèi)部進行更深層次成像的能力叶组。此外,由于顯微鏡光學(xué)器件的像差经伙,或者更隱蔽地扶叉,由樣品組織本身的光學(xué)性質(zhì),分辨率可能會受到負(fù)面影響帕膜。Sandstr?m解釋說枣氧,將聲光偏轉(zhuǎn)器(AOD)運用在共聚焦顯微鏡中,代替?zhèn)鹘y(tǒng)的振鏡掃描激光來解決這些限制垮刹。在聲光結(jié)構(gòu)中达吞,聲波被應(yīng)用于某些類型的光學(xué)透明材料,如晶體荒典,引起材料折射率的變化酪劫。這種折射率的變化使穿過材料的光發(fā)生偏轉(zhuǎn)。通過 ...
需要成像多種熒光團的問題寺董。我們期待Lumencor提供照明覆糟,以支持我們非常苛刻和廣泛的顯微鏡成像需求遮咖。來自尼康影像中心的評價無疑是對我們極大的肯定滩字,Lumencor光源能夠很好的適配包括尼康在內(nèi)主流的顯微鏡,容易集成到您的顯微系統(tǒng)中御吞,滿足您生物研究方面的各種需求麦箍。您可以從尼康的官網(wǎng)上看到https://www.microscope.healthcare.nikon.com/bioimaging-centers/nic-and-cofe/uc-san-diegoUCSD的尼康影像中心的大FOV寬場系統(tǒng)、高內(nèi)涵分析(HCA)系統(tǒng)陶珠、N-STORM/TIRF/CSU-X1 超分辨率和轉(zhuǎn)盤式共聚焦系統(tǒng)均 ...
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