使用空間散射偏移拉曼光譜檢測(cè)豬肉中β-激動(dòng)劑的優(yōu)勢(shì)β-激動(dòng)劑殘留在家畜體內(nèi)半衰期長(zhǎng)、代謝慢蒜埋、穩(wěn)定性差淫痰,對(duì)人類健康存在潛在風(fēng)險(xiǎn)。如果給畜禽大量喂食沙丁胺醇整份,大部分會(huì)沉積在動(dòng)物的肝待错、腎、肺烈评、肌肉等組織和器官中火俄,人類食用會(huì)對(duì)肝、腎等內(nèi)臟器官產(chǎn)生毒副作用讲冠,嚴(yán)重影響健康瓜客。高效液相色譜(HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)竿开、氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS) 谱仪、酶聯(lián)免疫吸附(酶聯(lián)免疫吸附)和毛細(xì)管電泳(CE) 等色譜方法已廣泛應(yīng)用于動(dòng)物飼料和組織中β-激動(dòng)劑的測(cè)定。這些方法可能具有較高的敏感性和特異性德迹。然而芽卿,它們通常耗時(shí)、勞動(dòng)密集胳搞、具有破壞性卸例,并且需要進(jìn)行預(yù)處理称杨,這使得實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)肉類中β-激動(dòng)劑的殘留變得困難 ...
模擬受激拉曼散射顯微鏡拉曼效應(yīng)是由C.V.拉曼在20世紀(jì)20年代發(fā)現(xiàn)。它是一種廣泛使用的光譜方法來(lái)確定分子的振動(dòng)模式筷转。與其他分析化學(xué)方法相比姑原,光譜方法提供了高空間分辨率。不需要直接接觸就可以獲得化學(xué)信息呜舒。振動(dòng)光譜提供了合理的化學(xué)特異性锭汛,而不需要額外的標(biāo)簽。然而袭蝗,自發(fā)拉曼效應(yīng)是一個(gè)弱散射過(guò)程唤殴。對(duì)于成像和顯微鏡的應(yīng)用來(lái)說(shuō),獲得一個(gè)視場(chǎng)可能需要幾個(gè)小時(shí)的信號(hào)整合時(shí)間到腥。因此朵逝,相干拉曼散射方法,如刺激拉曼散射效應(yīng)乡范,現(xiàn)在被廣泛用于拉曼成像配名。在這個(gè)應(yīng)用說(shuō)明中,我們將描述Moku:Lab的鎖相放大器是如何在波士頓大學(xué)的刺激拉曼成像裝置中實(shí)現(xiàn)的晋辆。介紹拉曼光譜是一種非破壞性的分析化學(xué)技術(shù)渠脉。它直接探測(cè)樣品的振動(dòng)模式 ...
一.簡(jiǎn)介拉曼散射光譜為生物分子的特異性檢測(cè)和分析提供了化學(xué)鍵的固有振動(dòng)指紋。那么什么是受激拉曼散射顯微鏡瓶佳?受激拉曼散射(SRS)顯微技術(shù)是一種相對(duì)較新的顯微技術(shù)芋膘,是一種相干拉曼散射過(guò)程,允許使用光譜和空間信息進(jìn)行化學(xué)成像[18]涩哟,由于相干受激發(fā)射過(guò)程[1]能產(chǎn)生約103-105倍的增強(qiáng)拉曼信號(hào)索赏,可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)視頻速率(約25幀/s)[2]的高速成像。SRS顯微鏡繼承了自發(fā)拉曼光譜的優(yōu)點(diǎn), 是一種能夠快速開發(fā)贴彼、label-free的成像技術(shù),同時(shí)具有高靈敏度和化學(xué)特異性[3-6], 在許多生物醫(yī)學(xué)研究的分支顯示出應(yīng)用潛力,包括細(xì)胞生物學(xué)埃儿、脂質(zhì)代謝器仗、微生物學(xué)、腫瘤檢測(cè)童番、蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊和制藥[7-11 ...
回光源精钮。任何散射的激發(fā)光都被二色鏡反射。濾光片將去除任何背景光剃斧,只透射紅細(xì)胞熒光發(fā)出波長(zhǎng)的光轨香。圖像傳感器將捕捉進(jìn)來(lái)的熒光。捕捉將以每秒數(shù)百或數(shù)千幀的幀率下進(jìn)行幼东,每幀的曝光時(shí)間數(shù)量級(jí)在幾毫秒到幾毫秒的一小部分臂容。電子倍增CCD (EMCCD)傳感器的光靈敏度足以捕捉到微弱的熒光科雳。但它們?cè)谌直媛氏轮荒軐?shí)現(xiàn)大約100fps的幀率,這對(duì)于目前的應(yīng)用來(lái)說(shuō)是不夠的脓杉。而CMOS傳感器可以在更高的幀率下工作糟秘,在全分辨率下可達(dá)每秒數(shù)千幀。然而球散,在每幀較短的曝光時(shí)間內(nèi)尿赚,普通的高速CMOS傳感器無(wú)法記錄足夠的光量來(lái)達(dá)到合理的信噪比。圖3 斑馬魚心臟中(圖像右下角)的紅細(xì)胞從一個(gè)腔室被運(yùn)送到下一個(gè)腔室(1-3)蕉堰,并進(jìn) ...
作用的湯姆遜散射效應(yīng)凌净,可以產(chǎn)生相干的硬X射線,波長(zhǎng)達(dá)0.4?屋讶。飛秒強(qiáng)激光與惰性氣體原子相互作用而引發(fā)的高次諧波泻蚊,可獲得軟X波段的相干輻射,波長(zhǎng)可覆蓋十納米至幾納米丑婿。飛秒激光在晶體中的二倍頻性雄、四倍頻、六倍頻效應(yīng)可將近紅外的飛秒激光變換至可見(jiàn)羹奉、紫外秒旋、極紫外和真空紫外,直至150nm诀拭,與高次諧波的軟X波段相接迁筛。利用飛秒激光在晶體中的參量振蕩和參量放大過(guò)程中,可以在近紅外耕挨,甚至紅外波段實(shí)現(xiàn)寬頻譜范圍的調(diào)諧细卧。除此之外,利用飛秒激光在非線性介質(zhì)中的傳輸筒占,可以發(fā)生自相位調(diào)制贪庙,四波混頻,孤子自頻移和超連續(xù)等多種非線性效應(yīng)翰苫,這些效應(yīng)都可以使飛秒激光器輸出的光脈沖從單一波長(zhǎng)變換到紫外至紅外波段止邮。特別值得提出的是, ...
射線有吸收和散射作用奏窑,從而引起射線能量的衰減导披。射線在物質(zhì)中的衰減是按照射線強(qiáng)度的衰減是呈負(fù)指數(shù)規(guī)律變化的,以強(qiáng)度為I的一束平行射線束穿過(guò)厚度為δ的物質(zhì)為例埃唯,穿過(guò)物質(zhì)后的射線強(qiáng)度為:I=Ie式中I—-射線透過(guò)厚度δ的物質(zhì)的射線強(qiáng)度撩匕;I—-射線的初始強(qiáng)度;e—-自然對(duì)數(shù)的底墨叛;δ—-透過(guò)物質(zhì)的厚度止毕;μ—-衰減系數(shù)(㎝)模蜡。射線無(wú)損測(cè)試缺陷自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)的硬件組成與結(jié)構(gòu)如圖1所示。系統(tǒng)主要由三個(gè)部分組成:信號(hào)轉(zhuǎn)換部分滓技、圖像處理部分及缺陷位置的獲取與傳輸部分哩牍。圖2 探測(cè)器外觀圖圖3 檢測(cè)系統(tǒng)示意圖信號(hào)轉(zhuǎn)換部分主要由X光光源、檢測(cè)樣品令漂、傳送車膝昆、線陣相機(jī)組成,信號(hào)轉(zhuǎn)換部分的主要功能是完成從x射線到可見(jiàn)光的信息載 ...
一種相干拉曼散射(CRS)過(guò)程叠必,其激發(fā)條件與共振CARS相同荚孵。與自發(fā)拉曼散射不同,在自發(fā)拉曼散射中纬朝,樣品被一個(gè)激發(fā)場(chǎng)照亮收叶,SRS中兩個(gè)激發(fā)場(chǎng)在泵浦頻率ωp和斯托克斯頻率ωs處重合在樣品上。如果激發(fā)束的差頻Δω = ωp?ωs與焦點(diǎn)內(nèi)分子的振動(dòng)頻率Ω相匹配共苛,即分子躍遷由于分子躍遷的刺激激發(fā)判没,速率提高。分子居群從基態(tài)通過(guò)虛態(tài)轉(zhuǎn)移到分子的振動(dòng)激發(fā)態(tài)(圖1A)隅茎。這與自發(fā)拉曼散射相反澄峰,自發(fā)拉曼散射從虛態(tài)到振動(dòng)激發(fā)態(tài)的轉(zhuǎn)變是自發(fā)的,導(dǎo)致信號(hào)弱得多辟犀。圖1.受激拉曼散射原理(A) SRS的能量圖俏竞。泵浦和斯托克斯束的共同作用通過(guò)虛態(tài)有效地將樣品中的分子從基態(tài)轉(zhuǎn)移到第一振動(dòng)激發(fā)態(tài)。被激發(fā)的振動(dòng)狀態(tài)可以通過(guò)調(diào)節(jié)泵和 ...
偽與自發(fā)拉曼散射相比堂竟,CRS技術(shù)可以產(chǎn)生更強(qiáng)的振動(dòng)敏感信號(hào)魂毁。CRS技術(shù)在光學(xué)顯微鏡中的普及與這些大大提高的信號(hào)水平密切相關(guān),這使CRS顯微鏡的快速掃描能力成為可能出嘹。然而席楚,除了更強(qiáng)的振動(dòng)信號(hào)之外,相干拉曼相互作用還提供了豐富的探測(cè)機(jī)制疚漆,用于檢查各種各樣的分子特性酣胀。一般來(lái)說(shuō),CRS技術(shù)比自發(fā)拉曼技術(shù)對(duì)介質(zhì)的拉曼響應(yīng)提供了更詳細(xì)的控制娶聘。所以在實(shí)際搭建相干拉曼系統(tǒng)時(shí),會(huì)有諸多問(wèn)題甚脉。當(dāng)?shù)冖俅螛?gòu)建CARS或SRS顯微鏡時(shí)丸升,很難確定PMT或鎖相放大器探測(cè)器上觀察到的信號(hào)的來(lái)源。然而牺氨,可以使用一個(gè)簡(jiǎn)短的檢查表來(lái)驗(yàn)證信號(hào)的身份狡耻。通常情況下墩剖,應(yīng)使用強(qiáng)諧振樣品(例如,兩個(gè)蓋卡片之間的一層薄十二烷)夷狰,并對(duì)樣品施加較大 ...
相干拉曼技術(shù)雙束光同步的粗調(diào)與細(xì)調(diào)方法對(duì)于相干拉曼技術(shù)岭皂,兩束激光必須在時(shí)間和空間上結(jié)合。常用的方法是使用二向色鏡和幾個(gè)轉(zhuǎn)向鏡進(jìn)行精細(xì)調(diào)整沼头,在空間上重疊光束相對(duì)簡(jiǎn)單爷绘。通常情況下,在組合光束路徑中間隔約1米的兩個(gè)光闌處的重疊可用于驗(yàn)證空間對(duì)準(zhǔn)进倍⊥林粒可根據(jù)CARS或SRS信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行微調(diào)』ィ基于opo的系統(tǒng)中的時(shí)間重疊是通過(guò)基于反向反射器的被動(dòng)延遲階段來(lái)實(shí)現(xiàn)的陶因,該延遲階段允許在保持空間對(duì)齊的同時(shí)調(diào)整兩個(gè)光束中的一個(gè)的路徑長(zhǎng)度(圖1)。由于使用的激光系統(tǒng)的重復(fù)頻率通常是80 MHz垂蜗,兩個(gè)脈沖之間的時(shí)間周期是p = 1/f = 12.5 ns楷扬。用這個(gè)周期乘以光速,得到距離約為3.75 m贴见。因此烘苹,為了找到時(shí)間重 ...
相干拉曼技術(shù)中常用的掃描方案掃描有兩種常用的方法:樣品掃描和光束掃描。樣品掃描提供了一個(gè)簡(jiǎn)單的設(shè)備蝇刀,但通常較低的速度和較小的視野螟加,而光束掃描更復(fù)雜的實(shí)現(xiàn),對(duì)光學(xué)系統(tǒng)的性能要求更高吞琐,但提供了更大的視野和更高的成像速度捆探。在樣品掃描中,整個(gè)相干拉曼光學(xué)設(shè)置是固定的站粟,樣品相對(duì)于焦點(diǎn)平移黍图。這意味著光學(xué)系統(tǒng)可以對(duì)準(zhǔn)一個(gè)固定的激光束,這比在一系列可能的激光束位置上對(duì)準(zhǔn)系統(tǒng)更容易奴烙。為了獲得高的空間分辨率助被,需要一個(gè)平移階段具有較高的精度和重復(fù)性要求。通常切诀,采用壓電驅(qū)動(dòng)的彎曲級(jí)揩环。這些階段提供的步長(zhǎng)和重復(fù)性遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)光學(xué)顯微鏡(通常小于5 nm)和較大數(shù)百微米的平移所要求的。這種制度主要有兩個(gè)缺點(diǎn):一是圖像的較大視場(chǎng) ...
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