TCSPC技術在熒光壽命成像顯微鏡中的應用熒光壽命成像顯微鏡(FLIM)利用熒光的壽命特性盲憎，因其對分子環(huán)境和分子構象變化的高度敏感性而得到廣泛應用嗅骄。FLIM已廣泛應用于研究細胞代謝的自熒光分子成像胳挎。自熒光分子的FLIM以非破壞性的方式提供了對細胞健康的獨特見解，經(jīng)常用于研究活體動物溺森。FLIM有利于探測熒光團的分子環(huán)境慕爬，以了解光強測量無法闡明的熒光團行為。圖1中概述了時域和頻域的FLIM測量屏积，并在下面進行詳細描述医窿。簡單地說，時域熒光壽命測量使用短脈沖光進行激發(fā)(相對于樣品的壽命較短)炊林，然后直接(即通過門控檢測或脈沖采樣)或使用時間分辨電子技術記錄熒光分子的指數(shù)衰減如圖1(a)及1(b)姥卢。另外，頻 ...
熒光的產(chǎn)生與熒光壽命檢測原理當處于基態(tài)的分子(圖1中的S0表示)吸收的光能量等于或大于較高能級的光(S1;S2;:::;Sn)渣聚，電子在短時間內(nèi)被激發(fā)到更高的能級独榴。電子將經(jīng)歷振動弛豫到激發(fā)態(tài)的最低振動水平(記為S1)，這是一種稱為內(nèi)轉換的非輻射過程奕枝。從S1電子態(tài)棺榔，分子通過輻射或非輻射過程回到基態(tài)。圖1表示了在這些能級中發(fā)生的不同發(fā)光現(xiàn)象隘道。熒光是分子(熒光團)通過發(fā)射可檢測的光子(時間尺度為)衰減到基態(tài)的輻射過程症歇。熒光發(fā)射發(fā)生在激發(fā)電子能級最低的位置(S1)郎笆。這種來自最低激發(fā)電子能級的強制發(fā)射確保了發(fā)射光譜保持不變，并且與激發(fā)波長無關忘晤。由于振動弛豫和內(nèi)部轉換中的能量損失宛蚓，發(fā)射的熒光光子的能量較低( ...
LIFA熒光壽命成像在微流體中的運用——研究氧在濕滑氣液界面上的輸運微流體提供了一個理想的平臺，允許集成“可控”的表面和直接測量附近的傳輸現(xiàn)象设塔。Elif Karatay在特文特大學攻讀博士學位期間使用微流體氣泡墊層苍息，制作了其中一個微通道壁作為由交替固體壁和微氣泡組成的超疏水表面(圖1)。她通過熒光壽命成像顯微鏡實驗測量和數(shù)值估計了在短接觸時間內(nèi)穩(wěn)定氣液界面上氣體吸收的動態(tài)傳質壹置。圖1 (a)微流控氣泡墊竞思。(b)FLIM實驗中相同設置下水中溶解氧的數(shù)值模擬，顏色條表示氧的濃度钞护。(c)由FLIM解析的壽命場疊加在亮場顯微鏡圖像上盖喷，顯示氣泡進入到水中，顏色條表示熒光壽命难咕，以納秒為單位课梳。通過頻域熒光壽命 ...
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TDC及TCSPC的技術原理-TCSPC高精度時間相關單光子計數(shù)模塊TDC技術和TCSPC技術都是用來進行時間測量的技術手段氧猬，雖然應用范圍大致相同，但是原理卻不同坏瘩。TDC原理如右圖所示盅抚。來自單光子探測器的光電子信號脈沖和來自激光器的參考脈沖輸入到延遲鏈中。時序邏輯查看延遲鏈中的數(shù)據(jù)倔矾，識別單光子和及激光脈沖的開始-停止對妄均，并以此方式確定單光子在激光脈沖序列中的時間位置。然后哪自，可以根據(jù)這些數(shù)據(jù)丰包，建立通常的TCSPC/FLIM光子分布。TCSPC技術所基于的原理是：在記錄低強度提陶、高重復頻率的脈沖信號時烫沙，由于光強很低，以至于在一個信號周期內(nèi)探測到一個光子的概率遠遠小于1隙笆。因此锌蓄，沒有必要考慮在一個信號周 ...
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本拉曼光譜柏肪、熒光壽命、光電流成像的基礎上新增光子反聚束功能芥牌，在方便快捷的進行零聲子線的測試的同時烦味，還可以完成光子反聚束的測量，極大的簡化色心的搜尋流程壁拉，迅速判斷制備工藝水平谬俄。該模塊有助于研究者用拉曼光譜和光致發(fā)光（PL）成像來表征樣品柏靶，快速確定目標區(qū)域（可能有單光子源的區(qū)域），隨后在同一儀器來進行反聚束實驗凤瘦。典型案例：對已經(jīng)進行過氮離子注入處理過的納米級金剛顆粒進行光譜分析宿礁，從而精準定位符合要求的潛在色心：上圖1為在5X物鏡下進行快速粗掃后得到的針對零聲子線峰位強度成像，圖2為40X物鏡下粗掃獲得的強度圖像蔬芥，可以看到十字標志處單獨存在的一個潛在優(yōu)質色心梆靖，圖3為該點的PL光譜圖，可以清晰看到63 ...
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