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多聚焦共聚焦拉曼光譜儀的優(yōu)點

發(fā)布時間:2022-10-11 15:14:02 瀏覽量:3243 作者:Leon

摘要

自發(fā)拉曼散射的一個主要限制是其固有的微弱信號沼侣,這使得生物標本的拉曼分析或成像速度慢祖能,在許多實際應用中不太方便。為了解決這一問題蛾洛,人們研究出了新的多焦檢測系統(tǒng)养铸,這一變化使得拉曼光譜的獲取速度有了顯著的提高。

正文


多聚焦共聚焦拉曼光譜儀的優(yōu)點



由于拉曼散射過程固有的低效率钞螟,拉曼顯微鏡的一個主要技術限制是信號采集時間過長。例如谎碍,使用自發(fā)拉曼微光譜對生物標本進行化學分析或成像需要幾十秒或幾分鐘的時間筛圆。表面增強拉曼散射(SERS)、相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)和受激拉曼散射(SRS)被開發(fā)用來增強拉曼散射信號,以提高拉曼分析或成像的速度闽晦。


然而扳碍,在SERS中使用金屬納米顆粒對生物應用造成了一些缺點,CARS或SRS通常局限于查詢一個振動模式仙蛉,而不是同時測量標本的全拉曼光譜笋敞。在不使用外源標記或納米顆粒的情況下獲得完整的光譜(例如400-2000 cm-1)可以更好地了解樣品中的化學成分和分子結構。為了提高自發(fā)拉曼光譜的分析通量或成像速度荠瘪,人們也做出了努力夯巷。線掃描拉曼成像系統(tǒng)使用激光線照明代替單一激光焦點,與傳統(tǒng)的逐點掃描技術相比哀墓,成像速度更快趁餐。然而,線掃描技術的成像速度的提高是有代價的篮绰;沿激光線方向的空間分辨率降低后雷。近年來,多聚焦共聚焦拉曼光譜儀通過在樣品平面上產生多個激光聚焦吠各,同時獲取所有激光聚焦點的所有拉曼光譜,實現(xiàn)了并行拉曼采集贾漏。多聚焦共聚焦拉曼光譜儀已被證明不僅能提高成像速度候学,還能保持較佳(衍射受限)的空間分辨率。


在多聚焦共聚焦拉曼光譜儀中纵散,一束激光通常會產生多個激光聚焦梳码。作為一種分時技術隐圾,一般采用振鏡作為快速掃描儀边翁,對單個激光聚焦進行快速掃描翎承,形成分時多聚焦。另一種技術使用空間光調制(SLM)或微透鏡陣列從一束激光產生多個激光焦點符匾,這被認為是一種空間多路復用技術叨咖。多聚焦共聚焦拉曼光譜儀的重要組成部分是對來自多個激光聚焦的所有拉曼光譜的平行檢測。使用微透鏡陣列來產生多個激光聚焦啊胶。纖維束被用來從激光聚焦陣列中收集所有的拉曼信號甸各,然后以線性堆疊的形式傳輸?shù)焦庾V儀的入口狹縫。采用多通道電荷耦合器件(ccd)攝像機對所有的拉曼光譜進行了檢測焰坪。使用一對掃描鏡產生分時的多個激光聚焦趣倾,第三個振鏡通過光譜儀的入口狹縫將每個聚焦的拉曼信號同步投射到多通道CCD相機上某饰。每個光譜被放置在相機的不同像素行上儒恋,以避免附近光譜通道之間的重疊和串擾。多聚焦共聚焦拉曼光譜儀在分析吞吐量或成像速度上比傳統(tǒng)的單點共聚焦拉曼系統(tǒng)快10倍以上黔漂。然而诫尽,這些之前的工作都是基于一維檢測技術炬守,例如牧嫉,沿CCD相機的垂直像素(沿光譜儀的入口狹縫方向)分辨無串擾的拉曼光譜。多通道CCD探測器的垂直尺寸限制了可以同時檢測的光譜數(shù)量减途,這zui終將限制并行拉曼采集的進一步改進酣藻。


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