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生物顯微成像系統(tǒng)

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模塊化可自定義光片顯微鏡(SPIM or LSFM)

  • 模塊化可自定義光片顯微鏡(SPIM or LSFM)
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模塊化設計蒜魄,可以自定義搭建扔亥,也可以輕易嫁接到商用顯微鏡上!

所屬類別:顯微成像系統(tǒng)及組件 ? 生物顯微成像系統(tǒng)

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產(chǎn)品負責人:

姓名:于工(Grin)

電話:131 2782 0466(微信同號)

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模塊化光片顯微鏡(light sheet microscope)組件


選擇性平面照明顯微鏡 (SPIM) 是一種快速谈为、溫和的成像技術旅挤,它將寬場成像的速度與適度的光學切片和低光漂白相結(jié)合。它已成為一種重要的熒光成像方式伞鲫,尤其是體積成像粘茄。 SPIM 也稱為光片熒光顯微鏡 (LSFM) 或簡稱為“光片”,光片顯微鏡因其具有光損傷小秕脓、切片品質(zhì)好柒瓣、采集速率快的特點在體積成像中迅速普及。

SPIM 的主要缺點是需要額外的光學器件來生成光片吠架。常見的是嘹朗,除檢測物鏡外,還需要一個與檢測物鏡正交放置的單獨的照明物鏡诵肛,其后連接生成光片的光學器件和激光源屹培。本質(zhì)上,顯微鏡需要圍繞樣品進行設計怔檩,添加額外的物鏡和光路會給成像系統(tǒng)和樣品安裝帶來空間限制褪秀。傳統(tǒng)的共焦或落射熒光顯微鏡具有單一光路,可以容納更廣泛的樣品薛训。換句話說媒吗,SPIM 的優(yōu)勢是以任何單一工具的適用范圍更窄為代價的,這導致了不同光片顯微鏡配置的激增乙埃。



自 2010 年代初以來闸英,應用科學儀器 (ASI) 一直采用模塊化方法來構建顯微鏡锯岖, ASI 的模塊化組件彼此之間可以輕松組合,形成完整的 SPIM 顯微鏡甫何,包括電動和壓電平臺出吹、光機械裝置以及用于創(chuàng)建和移動光片的掃描儀。完成該系統(tǒng)需要物鏡辙喂、激光器捶牢、濾光片和相機;我們提供多種標準配置的光片顯微鏡巍耗,包括 ISPIM秋麸、diSPIM、oSPIM 和 ct-dSPIM炬太。此外灸蟆,使用 ASI 的組件大大簡化了定制/DIY 光片系統(tǒng)的構建。


1)雙向倒置光片顯微鏡模塊(DISPIM)

DISPIM是一款靈活的易于安裝的光片顯微鏡組件亲族,該組件安裝到倒置顯微鏡上時可實現(xiàn)雙向觀測炒考。該組件兩個物鏡垂直放置在開放式培養(yǎng)皿的樣品上方,物鏡與垂直方向成45°孽水。該組件可以放置在常規(guī)倒置顯微鏡的頂部票腰,也可安裝在我們提供的RAMM/MIM框架組件上城看。

該組件有兩種配置:

①單面系統(tǒng)(iSPIM)

該系統(tǒng)一個物鏡通過常規(guī)的振鏡產(chǎn)生移動光片女气,使光片穿過樣品,通過振鏡移動光片同時移動壓電物鏡掃描臺完成3D成像测柠。該系統(tǒng)圖像獲取樣品迅速炼鞠,低成本,但是軸向分辨率低于XY平面分辨率轰胁。

②雙面系統(tǒng)(diSPIM)

在該系統(tǒng)中兩邊都包含光片掃描儀谒主、壓電物鏡掃描臺和相機,在實驗中兩個物鏡交替用于照明和檢測赃阀,同時在正交方向獲得樣品的圖像霎肯,并且將兩個方向的收集的數(shù)據(jù)集進行計算合并生成各向同性的3D圖,如果實驗需要也可以單面模式運行榛斯。該模塊XY&Z軸都具有較好的分辨率观游,但是需要購置更多的硬件,且后期需要更多的圖像處理驮俗。

2)透明組織專用光片顯微鏡(ct-SPIM)

該光片顯微鏡的外形結(jié)構與diSPIM/iSPIM結(jié)構類似懂缕,但是不包括倒置顯微鏡。該系統(tǒng)配置經(jīng)過優(yōu)化可對透明組織進行成像王凑。樣品放置在電動XYZ平臺上搪柑,由于樣品尺寸較大聋丝,平臺掃描是其成像的可行方式。采集速度受相機幀頻限制工碾。該模塊也是擁有兩種不同配置弱睦,即單面成像和雙面成像系統(tǒng)。

3)傾斜單面光片顯微鏡(OSPIM)

OSPIM系統(tǒng)是一個單面光片系統(tǒng)倚喂,上面物鏡以60°傾角安裝在RAMM框架上每篷,底測顯微鏡物鏡用于產(chǎn)生光片,該平臺可以安裝在商業(yè)上的倒置顯微鏡上端圈。

                           

此外還提供了搭建光片顯微鏡中常用的模組焦读,

1)光纖耦合激光掃描儀

光纖耦合激光掃描儀是一款緊湊而通用的2D掃描單元。設計適用于生成SPIM光片舱权。用戶提供的光束通過標準光纖連接器進入掃描儀矗晃,通過二維MEMS掃描鏡掃描成光片。掃描儀通常使用C型接口連接到顯微鏡上宴倍。

2)多重浸漬物鏡

該物鏡主要設計用于光片顯微鏡檢查透明組織樣品张症。由于物鏡具有獨特的第 一彎曲表面,因此物鏡可以在沒有任何校正環(huán)的情況下工作在任何折射率的介質(zhì)中鸵贬。物鏡可以浸入到苛刻的介質(zhì)俗他,例如DBE和BABB。


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