固態(tài)光源點(diǎn)亮熒光原位雜交技術(shù)---提升生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷新選擇什么是FISH鲤嫡？當(dāng)然這里的FISH并非水里游的魚(yú)類(lèi)，而是熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization绑莺，簡(jiǎn)稱(chēng)FISH），這是一種基于雙鏈核酸互補(bǔ)堿基配對(duì)的細(xì)胞或者組織中特定核酸序列（DNA或者RNA）檢測(cè)的技術(shù)惕耕。就如同釣魚(yú)一般纺裁，根據(jù)堿基互補(bǔ)原則，當(dāng)使用已知標(biāo)記單鏈核酸為探針（餌）司澎，如果與樣品中的未知單鏈核酸（魚(yú)）發(fā)生了特異性結(jié)合欺缘，形成可被檢測(cè)的雜交雙鏈核酸，并對(duì)該特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位挤安。F:熒光（Flourescence）顯微鏡用于對(duì)靶核酸序列位置進(jìn)行成像谚殊。該技術(shù)的其他變體也使用顯色原位 ...
革新多路復(fù)用熒光檢測(cè)長(zhǎng)久以來(lái)，在復(fù)雜蛤铜、異質(zhì)的樣品中同時(shí)識(shí)別以及定位多個(gè)分子或者分子組裝的能力一直是推動(dòng)熒光顯微鏡在生物和物理科學(xué)研究中應(yīng)用的主要特性嫩絮。例如，自1986年以來(lái)围肥，使用四種光譜上的不同熒光團(tuán)來(lái)識(shí)別DNA中的腺嘌呤（A）剿干、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）和鳥(niǎo)嘌呤（G）堿基穆刻，這一直是大多數(shù)自動(dòng)化DNA測(cè)序技術(shù)的基礎(chǔ)置尔。然而，對(duì)大規(guī)模生物系統(tǒng)的基因組和轉(zhuǎn)錄組的研究可能需要同時(shí)識(shí)別和定位成百上千的分子標(biāo)靶氢伟。這種高度并行的分析超出了基于光譜鑒別的多路復(fù)用能力榜轿。Lumencor分析了基于光譜鑒別的多路復(fù)用熒光檢測(cè)的局限性，以及為擴(kuò)大可檢測(cè)標(biāo)靶數(shù)量而引入的一些固態(tài)光源新技術(shù)朵锣。光譜鑒別的局限性大多數(shù)多路復(fù) ...
門(mén)控拉曼的熒光抑制方法及分類(lèi)門(mén)控法屬于時(shí)域法谬盐。前兩種方法的主要優(yōu)點(diǎn)是考慮了拉曼散射和熒光響應(yīng)的不同時(shí)間行為若河。第三種方法利用了即使在不同波長(zhǎng)下熒光也具有更寬光譜特性的事實(shí)勺择，而拉曼發(fā)射光譜與激發(fā)波長(zhǎng)耦合吞滞。該方法值得注意的技術(shù)包括位移激發(fā)拉曼差分光譜(SERDS)和減位移拉曼光譜缚俏，兩者都需要在光譜采集之后進(jìn)行額外的步驟婚陪。將傳統(tǒng)的連續(xù)波拉曼系統(tǒng)轉(zhuǎn)換為基于CCD光譜儀的SERDS設(shè)置只需要小小的修改茎活，即合并兩個(gè)稍微波長(zhǎng)移位的激光激發(fā)源仍劈，通常在全寬半MAX(FWHM)時(shí)分開(kāi)娄猫。一旦熒光變寬或扭曲拉曼峰椅您，計(jì)算方法提高信噪比的能力有限外冀。另一個(gè)缺點(diǎn)是，由于像素對(duì)像素靈敏度的隨機(jī)變化大于實(shí)際的拉曼信號(hào)掀泳，它們可以忽略 ...
引擎用于多重熒光檢查十多年以來(lái)雪隧，Lumencor的SPECTRA X光引擎一直是熒光顯微鏡領(lǐng)域的第1選擇西轩，以其多功能性和卓越性能而著稱(chēng)。它為研究人員提供了激發(fā)光譜的精確控制脑沿，在z小化串?dāng)_（crosstalk）藕畔、光譜滲漏（bleed-through）、自發(fā)熒光（autofluorescence）以及其他有害背景來(lái)源的同時(shí)也優(yōu)化了激發(fā)的效率【1】庄拇。SPECTRA X光引擎（2023）在其新版本中保留了用戶可更換的帶通濾光片注服，同時(shí)引入幾項(xiàng)重大改進(jìn)：擴(kuò)展光譜內(nèi)容：新型號(hào)采用固態(tài)LED光源，增大了光譜范圍措近，同時(shí)增強(qiáng)了與帶通濾光片和熒光基團(tuán)的兼容性溶弟，其中包括 365 nm 和 660 nm 處的新激發(fā)窗口 ...
- mpt是熒光壽命成像的合適探測(cè)器。2. CCDs and ICCDs一般來(lái)說(shuō)瞭郑，ccd是RS中特別常用的檢測(cè)器變體辜御，但對(duì)于TG設(shè)置，它們需要高度敏感(單光子計(jì)數(shù)能力)屈张，允許快速外部觸發(fā)擒权，并具有亞納秒范圍內(nèi)的時(shí)間分辨率。iccd符合這些要求袜茧。光學(xué)克爾門(mén)控菜拓，它的作用就像光譜儀入口狹縫前的一個(gè)光百葉窗，已經(jīng)被幾個(gè)小組用來(lái)觸發(fā)CCD笛厦。這種設(shè)置需要空間纳鼎，因此限制了系統(tǒng)的可移植性。Talmi制定了拉曼多通道和門(mén)控檢測(cè)的選擇指南裳凸。1993年贱鄙，Tahara和Hamaguchi首先通過(guò)構(gòu)造一個(gè)增強(qiáng)的基于ccd的條紋相機(jī)實(shí)現(xiàn)了高靈敏度和良好的時(shí)序分辨率。TG拉曼裝置中的條紋相機(jī)將樣品的背散射光引導(dǎo)到光電陰極上; ...
理論上證明了熒光干涉還原的概念姨谷。另一位先驅(qū)是Richard Van Duyne逗宁，他也是表面增強(qiáng)拉曼效應(yīng)的發(fā)現(xiàn)者之一。1974年梦湘，Van Duyne研究小組首次通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明瞎颗，使用羅丹明6g染料摻雜苯樣品可以抑制熒光，同時(shí)通過(guò)光電倍增管(PMT)和脈沖氬離子激光源在488nm激發(fā)下的組合來(lái)提高信噪比捌议。1976年哼拔，Yaney使用與Van Duyne等人類(lèi)似的裝置，但使用不同的脈沖激發(fā)源(ps脈沖Nd:YAG, 532 nm摻釹釔鋁石榴石激光器)瓣颅，發(fā)現(xiàn)TG拉曼與連續(xù)拉曼相比倦逐，在較短的激光脈沖寬度(約200 ns)下顯著改善了苯中吖啶橙的三個(gè)主要拉曼波段的光譜結(jié)果。他還指出宫补，環(huán)境光不會(huì)干擾門(mén)控拉曼光譜結(jié) ...
間門(mén)和伴隨的熒光抑制檬姥。根據(jù)圖1(a)所示的工作原理曾我，探測(cè)器僅在發(fā)射脈沖期間被激活，如圖1(b)所示健民。圖1(c)顯示了門(mén)控(虛線)和連續(xù)光(連續(xù)線)工作模式之間的差異抒巢，每種模式都有一個(gè)有效的拉曼光譜。直到zui近秉犹，門(mén)控拉曼光譜儀的復(fù)雜性虐秦、尺寸和價(jià)格阻礙了它的廣泛應(yīng)用。過(guò)去已經(jīng)使用了不同類(lèi)型的探測(cè)器凤优，例如多通道板(mcp)，光倍增管(pmt)和超快速和強(qiáng)化電荷耦合器件(iccd)蜈彼，帶有或沒(méi)有克爾門(mén)筑辨。從本質(zhì)上講，這些設(shè)備需要探測(cè)器冷卻幸逆，因此非常復(fù)雜和笨重(見(jiàn)表1)棍辕。自世紀(jì)之交以來(lái)，互補(bǔ)金屬氧化物半導(dǎo)體(CMOS)單光子雪崩二極管(SPAD)陣列探測(cè)器已經(jīng)商業(yè)化还绘。CMOS spad具有顯著減少上述缺點(diǎn) ...
點(diǎn)是樣品誘導(dǎo)熒光發(fā)射楚昭。這是一個(gè)競(jìng)爭(zhēng)現(xiàn)象，發(fā)生在相對(duì)較弱的拉曼散射下拍顷，并且可以模糊整個(gè)拉曼光譜抚太，使材料的識(shí)別或量化成為不可能。解決這一問(wèn)題的有效方法是時(shí)間門(mén)控(TG)昔案，這是信號(hào)處理中常用的一種技術(shù)尿贫。熱重光譜的目的是測(cè)量特定時(shí)間段內(nèi)的信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)瞬態(tài)過(guò)程的監(jiān)測(cè)踏揣。早在20世紀(jì)70年代庆亡，隨著科學(xué)家們?cè)跍y(cè)量過(guò)程中尋找去除熒光背景信號(hào)的方法，TG就進(jìn)入了RS領(lǐng)域捞稿。然而又谋，TG拉曼直到zui近幾年才開(kāi)始商業(yè)化。為了擴(kuò)大RS的普遍適用性娱局，克服熒光限制是很重要的彰亥。RS基于從激發(fā)波長(zhǎng)位移的光子的非彈性散射，稱(chēng)為Stokes和AntiStokes位移铃辖。它用于提供給定樣品中受激分子的信息剩愧。與紅外光譜(IR)類(lèi)似，該 ...
輸出用于激發(fā)熒光血管造影劑---吲哚菁綠（ICG）娇斩。除了光譜輸出外仁卷，SPECTRA光引擎還提供了三個(gè)附加功能穴翩，可增加其在術(shù)中成像應(yīng)用中的實(shí)用性：1.光傳輸SPECTRA光引擎的光輸出通常以光纖束傳輸。光纖束可以進(jìn)行分支锦积，提供兩路或者多個(gè)等分的光輸出芒帕，這些光輸出可以憑借不同的角度軌跡定向到手術(shù)區(qū)域。多向照明規(guī)避了可訪問(wèn)性和可見(jiàn)性的限制丰介，在手術(shù)區(qū)域等密閉空間中實(shí)現(xiàn)三維成像背蟆。2.不同設(shè)備的一致性能這一特性對(duì)于消除外窺鏡或者其他手術(shù)設(shè)備中光源的安裝和驗(yàn)證中的不確定性至關(guān)重要。因此哮幢，SPECTRA光引擎進(jìn)行設(shè)計(jì)带膀、制造和測(cè)試，旨在從一個(gè)設(shè)備到另一個(gè)設(shè)備提供一致的性能橙垢。圖3展現(xiàn)了這一特性垛叨，比較了50臺(tái)SPE ...
傳統(tǒng)的寬場(chǎng)熒光顯微鏡，(2) 熒光共聚焦顯微鏡柜某，以及 (3) 雙光子顯微鏡嗽元。2.液態(tài)變焦透鏡技術(shù)Optotune的液態(tài)變焦透鏡基于彈性聚合物材料。透鏡的核心部分由一個(gè)薄膜組成喂击，它在充滿液體的腔室和空氣之間形成一個(gè)界面（圖1）剂癌。為了調(diào)節(jié)焦距，一個(gè)音圈執(zhí)行器對(duì)圍繞透鏡清晰孔徑的液體儲(chǔ)層施加壓力翰绊。液體因此被壓入透鏡中心佩谷，改變薄膜的曲率〈亲觯控制液態(tài)變焦透鏡非常簡(jiǎn)單琳要，只需要一個(gè)現(xiàn)成的電流控制器或透鏡驅(qū)動(dòng)器，為透鏡提供0到290mA的電流即可秤茅。圖1 (a, b)：Optotune液態(tài)變焦透鏡的工作原理稚补。電流控制的電磁或機(jī)械執(zhí)行器向下推動(dòng)充滿液體的鏡頭容器，迫使鏡頭液體進(jìn)入鏡頭中心并改變其形狀 (c) 對(duì)于 ...
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