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使用SOLA光引擎進行GFP表達延時成像探求與COVID-19疫苗療效的相關(guān)性

發(fā)布時間:2023-05-30 10:48:39 瀏覽量:2564 作者:Robert

摘要

延時成像技術(shù)是在固定時間點拍攝連續(xù)圖像以捕捉所觀察到的動態(tài)的一種技術(shù)。而活細胞成像是利用延時成像(從毫秒到小時)研究活細胞的動態(tài)生理過程轨香。在COVID-19疫苗的研發(fā)過程中,Lumencor白光光源的優(yōu)良性能為研究GFP表達與疫苗療效的關(guān)系提供了便利臂容。

正文

使用SOLA光引擎進行GFP表達延時成像探求與COVID-19疫苗療效的相關(guān)性


通過脂質(zhì)轉(zhuǎn)染遞送mRNA一直是RNA療法開發(fā)面臨的長期挑戰(zhàn)科雳。此外,借助輝瑞/BioNTech和莫德納公司所研發(fā)的由脂質(zhì)納米顆粒(LNP)以及mRNA組成的COVID-19疫苗脓杉,脂質(zhì)遞送技術(shù)獲得了更多的關(guān)注。了解mRNA-脂質(zhì)體復合物制劑和細胞外培養(yǎng)基組成對蛋白質(zhì)免疫原下游表達的影響顯然很重要球散,而蛋白質(zhì)免疫原反過來又決定了疫苗的功效尿赚。2019年,在COVID-19大流行開始之前,來自慕尼黑大學和紐約州立大學石溪分校的一組研究人員描述了用單細胞陣列活細胞成像(LISCA)來監(jiān)測mRNA陽離子脂質(zhì)轉(zhuǎn)染后GFP表達的起效和速率凌净。將單細胞排列在微圖纖連蛋白基底上(圖1A)悲龟,與mRNA-脂質(zhì)復合物培養(yǎng)1小時泻蚊,然后通過延時熒光顯微鏡監(jiān)測20小時(圖1B)躲舌。

 

為了使GFP熒光真實地展現(xiàn)蛋白質(zhì)表達水平,穩(wěn)定且可重復的激發(fā)光源至關(guān)重要没卸,這使得SOLA光引擎成為該應用的理想高性能照明光源,并且低熱量與低噪聲也便于獲得更加優(yōu)質(zhì)的圖像信息秒旋。除了表征起效時間和蛋白表達速率的顯著細胞間變異性(圖1)外约计,LISCA還用于確定血清蛋白對不同mRNA-脂質(zhì)復合物制劑的細胞攝取的影響。



圖1:(A)單個GFP表達的HuH7細胞排列在微圖纖連蛋白上迁筛。(B)代表GFP表達的單細胞熒光軌跡煤蚌∠肝裕灰色陰影區(qū)域表示mRNA -脂質(zhì)復合物培養(yǎng)的zui初1小時尉桩。(C) 是(B)的放大區(qū)域,顯示細胞間蛋白表達起效的變異贪庙。根據(jù)知識共享署名許可條款,轉(zhuǎn)載自Reiser等人(2019)[1]止邮。

 

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相關(guān)文獻:

[1] Reiser A ,  Woschee D ,  Mehrotra N , et al. Correlation of mRNA delivery timing and protein expression in lipid-based transfection[J]. Integr Biol (Camb), 2019(9).


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