再過去的幾十年中威兜,內(nèi)窺鏡已被用于以微創(chuàng)或無創(chuàng)的方式觀察人體內(nèi)空腔內(nèi)部或人體內(nèi)部器官表面,以進行診斷或治療庐椒。然而椒舵,臨床上常用的普通白光內(nèi)窺鏡和放大內(nèi)窺鏡的分辨率低、對比度差,需要通過病理活檢來確診约谈。近年來,新應用于臨床的窄譜技術通過光學或數(shù)字濾波的方式利用藍光照射組織笔宿,以強化黏膜表面的細微結(jié)構(gòu)和微血管形態(tài),提高成像對比度,但仍未解決成像分辨率低的問題。因此,白光和窄帶光內(nèi)窺鏡無法實現(xiàn)光學活檢,嚴重降低了診斷的準確性棱诱。共聚焦內(nèi)窺鏡由于分辨率可達亞微米量級并且具有光學切片的能力,可以呈現(xiàn)出與病理活檢高度一致的細胞形態(tài)泼橘。共聚焦內(nèi)窺顯微成像技術在消化道、皮膚军俊、眼部等疾病的診斷方面具有重要作用侥加。
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共聚焦內(nèi)窺顯微成像技術及其應用
前言:再過去的幾十年中,內(nèi)窺鏡已被用于以微創(chuàng)或無創(chuàng)的方式觀察人體內(nèi)空腔內(nèi)部或人體內(nèi)部器官表面粪躬,以進行診斷或治療担败。然而,臨床上常用的普通白光內(nèi)窺鏡和放大內(nèi)窺鏡的分辨率低镰官、對比度差,需要通過病理活檢來確診提前。近年來,新應用于臨床的窄譜技術通過光學或數(shù)字濾波的方式利用藍光照射組織,以強化黏膜表面的細微結(jié)構(gòu)和微血管形態(tài),提高成像對比度,但仍未解決成像分辨率低的問題泳唠。因此,白光和窄帶光內(nèi)窺鏡無法實現(xiàn)光學活檢,嚴重降低了診斷的準確性狈网。共聚焦內(nèi)窺鏡由于分辨率可達亞微米量級并且具有光學切片的能力,可以呈現(xiàn)出與病理活檢高度一致的細胞形態(tài)。共聚焦內(nèi)窺顯微成像技術在消化道笨腥、皮膚拓哺、眼部等疾病的診斷方面具有重要作用。
一脖母、共聚焦內(nèi)窺顯微成像的優(yōu)勢
在光學顯微鏡中士鸥,照明光在整個視野中應盡可能均勻地穿過樣品。對于較厚的樣品谆级,如果物鏡沒有足夠的焦深烤礁,來自焦平面上方和下方的樣品平面的光就會被檢測到讼积。失焦的光線會增加圖像的模糊度,從而降低分辨率脚仔。在熒光顯微鏡中勤众,視野中的任何染料分子都會受到刺激,包括離焦平面中的染料分子鲤脏。共聚焦顯微技術利用共聚焦系統(tǒng)有效地排除了焦面以外光信號的干擾们颜,提高了分表率,實現(xiàn)了光學切片凑兰。目前掌桩,共聚焦顯微成像技術是生物醫(yī)學領域非常重要的分析工具,借助該技術姑食,研究人員能夠?qū)毎械奶囟ǔ煞诌M行光學切片和三維(3D)重建波岛。
自20世紀60年代引入柔性胃腸(GI)內(nèi)窺鏡檢查以來,內(nèi)窺鏡成像技術不斷取得進步音半。在過去的幾十年中则拷,內(nèi)窺鏡已被用于以微創(chuàng)或無創(chuàng)的方式觀察空腔內(nèi)部或人體內(nèi)部器官的表面,以進行診斷或手術曹鸠。目前臨床上常用的白光和窄帶光內(nèi)窺鏡無法達到細胞水平的分辨率煌茬,因此無法實現(xiàn)光學活檢,嚴重降低了診斷的準確性彻桃。共聚焦顯微成像技術的分辨率可以達到亞微米級別并且具有光學切片的能力坛善,它可以呈現(xiàn)與病理活檢高度一致的細胞形態(tài)。自2004年問世以來邻眷,共聚焦激光內(nèi)窺鏡技術已成為腸胃成像的重要工具眠屎。基于該技術肆饶,內(nèi)窺鏡醫(yī)師可以在焦平面進行細胞成像和組織結(jié)構(gòu)評估改衩,獲得實時的體內(nèi)組織信息。
二驯镊、共聚焦顯微成像的基本原理
共聚焦顯微成像技術是Minsky于1957年提出的葫督,通過在同一共軛圖像平面上使用照明側(cè)和檢測側(cè)針孔來實現(xiàn)“共聚焦”。1967年Egger和Petran成功地將共聚焦顯微成像技術用于神經(jīng)組織的無標記成像板惑。在共聚焦顯微成像技術中橄镜,單色激光經(jīng)過一個照明針孔后形成點光源,一個物鏡將點光源聚焦到樣品上冯乘,在探測端由另一個物鏡將來自樣品的信號聚焦到探測針孔處蛉鹿。在這個過程中,使用單光束掃描的方式使用點光源在樣品上進行逐點掃描往湿,實現(xiàn)二維成像妖异,這就是激光掃描共聚焦顯微鏡的工作原理。共聚焦顯微成像技術的關鍵在于兩個針孔的“共聚焦”可以屏蔽所有來自非焦面的信號领追,在探測針孔后的光電倍增管只能探測來自焦平面的信號他膳。因此,該技術具有光學切片的能力绒窑。
結(jié)語:共聚焦顯微技術是近十幾年迅速發(fā)展起來的一項高新研究技術棕孙,目前應用領域擴展到細胞學、微生物學些膨、發(fā)育生物學蟀俊、遺傳學、神經(jīng)生物學订雾、生理和病理學等學科的研究工作中肢预,成為現(xiàn)代生物學微觀研究的重要工具。
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